干擾物是臨床實(shí)驗室檢測誤差的一個(gè)很重要的來(lái)源，它們在某種程度上對病人來(lái)說(shuō)表現為是一種危害。常規工作中精密度通過(guò)室內質(zhì)控監控，準確性通過(guò)與參考物質(zhì)作比較試驗進(jìn)行驗證，但實(shí)驗室不能很容易的檢測干擾物質(zhì)引起地誤差。

廣義上干擾物是導致分析物濃度或催化活力出現偏移的物質(zhì)，如免疫法干擾常由交叉反應所致，因此，干擾物通過(guò)干擾作用來(lái)影響分析特異性，從干擾物來(lái)源，干擾作用分為內源性和外源性干擾。

內源性干擾物質(zhì)

1.類(lèi)風(fēng)濕因子（Rheumatoidfactors，RF）類(lèi)風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）是一種抗人或動(dòng)物IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體，是以變性IgG為靶抗原的自身抗體。RF最初由Rose等（1984年）在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節炎（RA）患者血清中發(fā)現。RA患者體內有產(chǎn)生RF的B細胞克隆，在變性IgG或EB病毒的直接作用下可大量合成RF。RF主要為IgM類(lèi)自身抗體，但也有IgG類(lèi)、IgA類(lèi)、IgD類(lèi)和IgE類(lèi)。

人血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）可以與ELISA系統中的捕獲抗體及酶標記二抗的Fc段直接結合，從而導致假陽(yáng)性。、

類(lèi)風(fēng)濕因子干擾的排除
1、用F（ab）替代完整的IgG。

2、標本用聯(lián)有熱變性（63°C，10min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效）。
3、檢測抗原時(shí)，可以用2-巰基乙醇等加入到標本稀釋液中，使RF降解。

2、嗜異性抗體

嗜異性抗體（Id）是由低純度抗原引起的，又稱(chēng)之為對非特異性抗原產(chǎn)生的抗體應答。

天然的嗜異性抗體（IgG）可分為兩類(lèi)：

 一類(lèi)（85%的假陽(yáng)性或假增高由其引起）可結合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域，但不與兔IgG的Fab區結合。

另一類(lèi)（15%的假陽(yáng)性或假增高由其引起）可結合于小鼠、馬、牛和兔IgG的FC區表位，但不與山羊和大鼠IgG的FC區表位結合。嗜異性抗體可通過(guò)交聯(lián)固相和酶標的單抗或多抗而出現假陽(yáng)性或假增高反應。其也可造成假陰性或假降低的結果。

嗜異性抗體干擾的排除
使用特異的兔F（ab’）2片段作為固相或酶標抗體。在標本或標本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物Ig，封閉可能存在的嗜異性抗體。但加入量不足或亞類(lèi)不同時(shí)無(wú)效。使用靶特異的非Ig親和蛋白（Affibody）替代固相或酶標抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來(lái)自單個(gè)金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）聯(lián)合文庫的人IgA結合親和蛋白，用于IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。

3、人抗動(dòng)物（如小鼠、免、羊等）抗體

人抗小鼠抗體（human anti-mouse antibodies，HAMA）：抗鼠抗體對使用鼠源性單克隆抗體的免疫測定，可產(chǎn)生假陽(yáng)性（定量檢測假增高）或假陰性（定量假降低）結果。
干擾排除的方法
使用特異的抗體F（ab’）2片段作為固相或測定酶標抗體。
在標本或標本稀釋液中加入過(guò)量的鼠Ig，封閉可能存在的抗鼠抗體。

使用特異的雞抗體IgG作為固相和測定抗體。雞IgG不與人抗鼠抗體反應。因而，用其作為固相或酶標抗體不會(huì )出現假增高或假降低結果。

4、自身抗體

自身抗體如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素、抗甲狀腺激素抗體等，能與其相應靶抗原結合形成復合物，在免疫測定方法中可干擾相應抗原抗體的測定。
自身抗體干擾排除的方法
測定前需用理化方法將其解離后再測定。    

5、補體

 補體（complement，C）是存在于正常人和動(dòng)物血清與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)。早在19世紀末Bordet即證實(shí)，新鮮血液中含有一種不耐熱的成分，可輔助和補充特異性抗體，介導免疫溶菌、溶血作用，故稱(chēng)為補體。補體是由30余種可溶性蛋白、膜結合性蛋白和補體受體組成的多分子系統，故稱(chēng)為補體系統（complement system）。根據補體系統各成分的生物學(xué)功能，可將其分為補體固有成分、補體調控成分和補體受體（CR）。

 ELISA系統中固相一抗和標記二抗過(guò)程中，抗體分子發(fā)生變構，其Fc段的C1q分子結合位點(diǎn)被暴露出來(lái)，使C1q可以將二者連接起來(lái)，從而造成假陽(yáng)性。

補體干擾的排除
1、用EDTA稀釋標本。
2、用53°C，10min加熱血清使C1q滅活。

6、溶菌酶

溶菌酶（lysozyme）又稱(chēng)胞壁質(zhì)酶（muramidase）或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過(guò)破壞細胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1，4糖苷鍵，使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，導致細胞壁破裂內容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結合，與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活。因此，該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。
溶菌酶可與等電點(diǎn)較低的蛋白有強的結合能力。免疫球蛋白等電點(diǎn)約為5，因此，在雙抗體夾心法測定中，溶菌酶可在包被的IgG和酶標的IgG間形成橋接，從而導致假陽(yáng)性或假增高結果。
排除方法
為保證免疫測定的可靠性，有必要從標本中去除溶菌酶或將其封閉，Cu2+離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶，防止其聯(lián)接IgG。

7、抗試劑成份的抗體

抗鏈霉親合素抗體（anti-streptavidin antibodies）：鏈霉親合素（streptavidin）是由Streptomyces avidinni產(chǎn)生的，機體為什么會(huì )出現抗鏈霉親合素抗體的原因目前尚不清楚。抗釕抗體（antiruthenium antibodies）。

8、被動(dòng)獲得的外源抗體或抗原

靜脈輸注免疫球蛋白獲得抗病原體的抗體（如抗梅毒抗體、抗-HCV、抗-HBs等）；新生兒獲得的來(lái)自母體的特異IgG；新生兒獲得的來(lái)自乙肝“大三陽(yáng)”母親的HBeAg。

9、交叉反應（cross reaction）

交叉反應是兩種來(lái)源不同的抗原，彼此之間可以有相同的抗原決定簇，由此決定簇刺激機體產(chǎn)生的抗體不僅可分別與其自身表面的相應抗原表位結合，而且還能與另一種抗原的相同表位結合發(fā)生反應，稱(chēng)為交叉反應。
交叉反應現象的形成可能與下列因素有關(guān)：

1、共同抗原，不同生物體的某些生物大分子具有相同的抗原結構；
2、共同表位，不同的生物大分子的某些片段（肽段）具有相同的表位；
3、相似表位，不同的生物大分子，其表位的部分空間構象十分類(lèi)似，可以和同一種抗體的互補決定區相契合。激素、小分子半抗原等易受到交叉反應影響。10、生物素（biotin）

生物素又被稱(chēng)為維生素B7或維生素H，是一種水溶性B族維生素。生物素的缺乏主要會(huì )損害皮膚、粘膜和神經(jīng)系統，在普通人群中長(cháng)期的生物素缺乏可能導致毛發(fā)、指甲、皮膚的損害。

生物素-親合素系統是上世紀70年代末發(fā)展起來(lái)的一種新型生物反應放大系統?，F被廣泛應用于醫學(xué)各領(lǐng)域。在體外診斷的實(shí)際應用中更是具有巨大的優(yōu)越性，生物素可與幾乎所有生物大分子結合，親和力高，結合穩定，靈敏度高，具有多級放大作用。生物素干擾存在于使用生物素-親和素系統或生物素-抗生物素系統的檢測中。與儀器廠(chǎng)家、儀器型號、發(fā)光底物無(wú)關(guān)，同一廠(chǎng)家不同項目包被方式也可能不同。生物素對化學(xué)發(fā)光產(chǎn)生干擾需要一定的濃度，不同項目/試劑抗生物素干擾的能力不同。生物素干擾可能產(chǎn)生假陽(yáng)性，也可能產(chǎn)生假陰性。一般來(lái)說(shuō)，夾心法產(chǎn)生假陰性，競爭法產(chǎn)生假陽(yáng)性。

外源性干擾物質(zhì)

1、溶血
溶血（Hemolysis）紅細胞破裂，血紅蛋白逸出稱(chēng)紅細胞溶解，簡(jiǎn)稱(chēng)溶血?？捎啥喾N理化因素和毒素引起。在體外，如低滲溶液、機械性強力振蕩、突然低溫冷凍（-20℃～－25℃）或突然化凍、過(guò)酸或過(guò)堿，以及酒精、乙醚、皂堿、膽堿鹽等均可引起溶血。
標本溶血時(shí)可釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為標記的ELISA測定中，會(huì )導致非特異性顯色，干擾測定結果。
解決方法

標本采集和處理時(shí)必須注意避免溶血。

2、標本被細菌污染

細菌菌體中可能含有內源性辣根過(guò)氧化物酶，在ELISA試驗中可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結果。

3、標本保存時(shí)間過(guò)長(cháng)

部分項目因穩定性時(shí)間較短，需嚴格注意標本保存時(shí)間。

4、標本凝固不全

血液采集后，如收集管中無(wú)促凝劑和抗凝劑，則血液通常在半小時(shí)后開(kāi)始凝固，18~24h完全凝固。日常檢驗中，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即離心分離血清，此時(shí)因血液沒(méi)有完全凝固，離出的“血清”并非為完全的血清，其中仍殘留部分纖維蛋白原，易形成干擾，造成假陽(yáng)性。  

5、樣本離心時(shí)間

個(gè)別標本由于離心制備不徹底，造成假陽(yáng)性結果，如果忽略掉就會(huì )給臨床造成誤診，引起不必要的醫療糾紛。故建議檢驗人員若遇到疑似陽(yáng)性標本，最好延長(cháng)離心時(shí)間，重復測定，可以降低假陽(yáng)性率，增加檢驗結果的準確性。

結論

干擾物質(zhì)影響分析特異性，檢驗工作者在日常工作中需格外注意，必須減少樣本中的干擾物質(zhì)，避免對測定結果產(chǎn)生影響。